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熒光標記二抗種類繁多,如何選擇?

一般來講,偶聯(lián)到二抗上的探針主要有酶(辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),熒光基團(FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine)和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實驗,對于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶標二抗;而細胞或組織標記實驗(細胞免疫化學(xué),組織免疫化學(xué),流式細胞術(shù))中通常使用熒光標記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使Biotin/Avidin檢測系統(tǒng)。其中熒光素是具有光致熒光特性的染料,熒光染料種類很多,目前常用于熒光標記二抗的主要有以下幾種: 異硫氰酸熒光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC) FITC純品為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389.4,最大吸收光波長為490~495nm,最大發(fā)射光波長為520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是目前應(yīng)用最廣泛的熒光素。由于FITC是小分子化合物,每一個抗體可標記幾個FITC分子,IgM通常用小分子的熒光素標記,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC熒光二抗主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感,通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。然而FITC的缺點是淬滅快,因此要和抗淬滅劑一起使用。 四甲基異硫氰酸羅丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC),Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR) 這些羅丹明的衍生物耦聯(lián)基團具有不同的吸收波長 (550, 570, 596nm)和最大發(fā)射波長(570, 590, 620nm)。在使用裝有氪氬燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標記的實驗時,RRX尤其有用,可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用,因為RRX的發(fā)射波長在Cy2和Cy5中間,而且和這兩者覆蓋都很少,氪氬燈激發(fā)光為488nm,598nm和647nm,分別是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激發(fā)波長。因為FITC和PE可以被氬燈的488nm波長激發(fā), 在流式細胞儀中用FITC作雙標,另一種用藻紅蛋白(PE)耦聯(lián)基團要比羅丹明好。TRITC為羅丹明的衍生物,呈紫紅色粉末,較穩(wěn)定,最大吸收光波長為 550nm,最大發(fā)射光波長為620nm,呈現(xiàn)橙紅色熒光,與FITC的綠色熒光對比鮮明,可配合用于雙重標記或?qū)Ρ热旧?。因TRITC熒光淬滅慢,也可用于單獨標記染色。 菁類染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5) Cy2耦聯(lián)基團激發(fā)波長為492nm,發(fā)光波長為510nm的綠色可見光。Cy2和FITC使用相同的濾波片。由于Cy2比FITC在光下更穩(wěn)定,要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片劑,因為這種抗淬滅劑和Cy2反應(yīng),在染色片儲存后會導(dǎo)致熒光微弱和擴散。Cy3和Cy5比其他的熒光團探針要更亮,更穩(wěn)定,背景更弱。Cy3耦聯(lián)基團激發(fā)光的最大波長為550nm,最強發(fā)射光為570nm。因為激發(fā)光和發(fā)射光波長很接近TRITC, 在熒光顯微鏡中,可使用和TRITC一樣的濾波片。Cy3在氬光燈(514nm或528nm)下可以被激發(fā)出50%的光強,在氦氖燈(543nm)或者汞燈(546nm)下則約75%。Cy3可以和熒光素一起作雙標。Cy3還可以和Cy5一起在共聚焦顯微鏡實驗中作多標記。Cy5耦聯(lián)基團的激發(fā)波長最大650nm,發(fā)光波長最大670nm。在氪氬燈(647nm)下它們可被激發(fā)出98%的熒光,在氦氖燈下(633nm)為63%。Cy5可以和很多其他的熒光基團一起用在多標記的實驗中。由于它的最大發(fā)射波長在670nm,Cy5很難用裸眼觀察,而且不能用汞燈作理想的激發(fā)。通常觀察Cy5時采用具有合適激發(fā)光和遠紅外檢測器的共聚焦顯微鏡,在水相封片劑中應(yīng)當(dāng)加入抗淬滅劑。使用傳統(tǒng)的表面熒光顯微鏡時,不推薦使用Cy5。注:由于觀察熒光需要一定波長的激發(fā)光,必須根據(jù)實驗室已有的儀器可發(fā)光的波段進行選擇。另外注意多標記中對探針色彩區(qū)分程度的要求,例如,若丹明紅-X (RRX)和德克薩斯紅(TR)熒光素的區(qū)別就比四甲基若丹明(TRITC)或者Cy3的區(qū)別明顯。如果對靈敏度有更高的要求,則Cy3和Cy5就比其他的熒光團探針要亮。 西美杰代理的全球知名二抗和底物生產(chǎn)廠商LGC·Seracare·KPL提供豐富的熒光標記二抗,可檢測抗人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛,以及多種細菌類等物種;另外,還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同類型抗體。小編下面匯總了部分常用熒光二抗:FITCTRITCCy3Cy5抗人5230-02885230-0288-5230-0370抗小鼠5230-04275230-03365230-03645230-0376抗兔5230-02985230-03325230-03595230-0372抗山羊5230-0294-5230-03585230-0371抗綿羊5230-0324---抗雞5230-0325--5230-0379抗鴨5230-0326---抗狗5230-0314---抗貓5230-0317---鏈霉親和素5270-0028 -5270-0022 -注:表格數(shù)字部分為產(chǎn)品貨號如對西美杰代理的LGC·Seracare·KPL產(chǎn)品感興趣歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄官方網(wǎng)站www.yinaibengfa.cn了解更多信息。 更多>

Jena Bioscience熒光標記試劑盒,科研優(yōu)選

標記核苷酸是生命科學(xué)研究的一類關(guān)鍵試劑,是分子生物學(xué)研究中用于檢測和標記特定核酸序列的有效工具,通常通過酶反應(yīng)將標記核苷酸插入到DNA或RNA序列中進行檢測和分析。而熒光基團和半抗原是最常用的非放射性DNA/cDNA探針標記物。 Nick translation是基因組DNA、質(zhì)粒、BAC克隆等生成標記DNA探針(100-500bp)的首選方法。它是基于DNA酶I(introduction of random single-strand breaks (“nicks”)和聚合酶I的協(xié)同反應(yīng),聚合酶I在“nick”位點結(jié)合標記的dUTP,而不是其天然對應(yīng)物dTTP,從而創(chuàng)造出理想的原位雜交探針。 西美杰代理的Jena Bioscience品牌提供了有豐富的DNA/cDNA標記產(chǎn)品,包括熒光標記和半抗原標記,如下表所示:Fluorescent Nick Translation Labeling Kits 品名 貨號 規(guī)格 Atto425 NT Labeling Kit PP-305S-425 10 reactions Fluorescein NT Labeling Kit PP-305S-FAMX 10 reactions AF488 NT Labeling Kit PP-305S-AZ488 10 reactions Atto488 NT Labeling Kit PP-305S-488 10 reactions Cy3 NT Labeling Kit PP-305S-CY3 10 reactions Atto550 NT Labeling Kit PP-305S-550 10 reactions AF555 NT Labeling Kit PP-305S-AF555 10 reactions TexasRed NT Labeling Kit PP-305S-TXR 10 reactions AF594 NT Labeling Kit PP-305S-AF594 10 reactions Atto647N NT Labeling Kit PP-305S-647N 10 reactions AF647 NT Labeling Kit PP-305S-AF647 10 reactions Atto680 NT Labeling Kit PP-305S-680 10 reactions Biotin & Digoxigenin Nick Translation Labeling Kits 品名 貨號 規(guī)格 Biotin16 NT Labeling Kit PP-310S-BIO16 10 reactions Digoxigenin NT Labeling Kit PP-310S-DIGX 10 reactions 北京西美杰科技有限公司為Jena Bioscience中國代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站 西美杰代理的Jena Bioscience由德國馬普所(MPI)的知名分子生物學(xué)家于1998年共同創(chuàng)辦,致力于為全球的科研院所,醫(yī)院,制藥企業(yè)和診斷試劑盒生產(chǎn)企業(yè)提供各類試劑與原料, 供應(yīng)特色標記核苷酸/類核苷,標記熒光探針、點擊化學(xué)、蛋白結(jié)晶等產(chǎn)品,分別通過DIN EN ISO 9001,DIN EN ISO 14001,EMAS認證,質(zhì)量被80多個國家客戶認可。 品牌優(yōu)勢: 以核苷,核苷酸類似物為特色的產(chǎn)品 種類齊全:核苷,核苷酸及類似物,蛋白及蛋白表達系統(tǒng),點擊化學(xué)試劑,生物大分子結(jié)構(gòu)研究相關(guān)試劑,分子生物學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)試劑 強大的技術(shù)團隊可提供高質(zhì)量定制服務(wù) 產(chǎn)品質(zhì)量有保障,通過多種認證 產(chǎn)品和服務(wù)被80多個國家客戶認可 主要產(chǎn)品分類: 核苷、核苷酸類似物: 標記核苷酸、脫氧/雙脫氧核糖核苷酸、核苷酸類似物 點擊化學(xué):帶有點擊基團的核苷酸、熒光素、生物素、ATP類似物等; 蛋白結(jié)構(gòu)相關(guān)產(chǎn)品:蛋白結(jié)晶條件篩選試劑盒、蛋白結(jié)晶耗材 分子生物學(xué):不同要求PCR試劑盒及單組分產(chǎn)品,DNA LEEDER,限制性內(nèi)切酶、TAE、TBE 更多>

【技術(shù)在線】HCP ELISA方法驗證——稀釋線性dilution linearity

稀釋線性(dilution linearity)是驗證HCP ELISA方法特異性和準確性的關(guān)鍵實驗之一,本文詳細解讀了HCP ELISA方法學(xué)驗證中有關(guān)稀釋線性的操作方法與注意事項,歡迎了解。 更多>

Mirus Bio新上市轉(zhuǎn)染試劑TransIT?-AAViator,基于逆向工程,最大化的提升AAV滴度和實心率!

腺相關(guān)病毒 (AAV) 是基因治療中最廣泛使用的傳遞/遞轉(zhuǎn)機制。近年來,基于AAV病毒所開發(fā)的基因療法研發(fā)及臨床試驗注冊數(shù)量也呈指數(shù)級增長,也需要AAV病毒生產(chǎn)工藝及產(chǎn)能的不斷優(yōu)化及擴展,從最早基于貼壁細胞工藝升級轉(zhuǎn)換到以懸浮為主的200-2000L反應(yīng)體系。 Mirus Bio成立于1996年,在核酸遞送領(lǐng)域深耕多年,于2021年8月推出GMP級別TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑,支持AAV及LV從科研到GMP商業(yè)化生產(chǎn)。不同于傳統(tǒng)基于單組分的轉(zhuǎn)染試劑(如陽離子聚合物聚乙烯亞胺,PEI),Mirus Bio將專利的多聚物及脂質(zhì)技術(shù)進行多重組合,形成多功能性的轉(zhuǎn)染方案,克服細胞遞轉(zhuǎn)過程中的多重阻礙,以實現(xiàn)更高效轉(zhuǎn)染和更低細胞毒性,從而大幅度提升多種血清型AAV病毒生產(chǎn)載量。去年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer,已證明在不同AAV血清型別中,可提高AAV病毒基因組滴度1.2-4.9倍,并且在一定程度改善了實心率。更重要的是,RevIT? AAV Enhancer不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 轉(zhuǎn)染試劑,也適配于其他轉(zhuǎn)染試(如PEI等),使得AAV生產(chǎn)上游成本的進一步降低成為可能,進而降低了基因治療單劑量成本。下圖展示了國內(nèi)客戶前期測試反饋結(jié)果,測試包括了不同血清型別的質(zhì)粒設(shè)計,適用于國內(nèi)及國外品牌的轉(zhuǎn)染試劑、細胞及培養(yǎng)基體系,實現(xiàn)了1.5-4倍以上的AAV病毒滴度提升。 RevIT Enhancer在國內(nèi)客戶不同AAV項目平臺上的測試反饋結(jié)果 隨著國內(nèi)外客戶項目及管線推進,已有越來越多的客戶將TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶階段線性放大至200L-500L反應(yīng)器,并且已應(yīng)用到處于臨床申報產(chǎn)品中。ReciBioPharm 與Mirus Bio合作, Chris Brown(工藝流程開發(fā)部門)在線上(鏈接)展示了TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)結(jié)果,并且比較了所有測試規(guī)模(搖瓶&反應(yīng)器),反饋病毒滴度放大效果非常好,并且實心率也保持相同水平,在 50 升的生物反應(yīng)器中,也有著40%以上實心率。Chris Brown表示“選擇用TransIT-VirusGEN 和RevIT? AAV Enhancer產(chǎn)品,是基于我們以往的測試數(shù)據(jù),允許最大限度地提高 AAV 產(chǎn)量。產(chǎn)量的提高,單個50 升生物反應(yīng)器可生產(chǎn)更多劑量,從而降低單位劑量的成本。” 更多的,Bridgebio在poster中分享了基于AAV5型別,使用TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer從搖瓶線性放大至200L反應(yīng)體系(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L),病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結(jié)果(圖1)。與原有工藝相比 (Process A:PEIPro轉(zhuǎn)染 + Expi293細胞/培養(yǎng)基),替換成TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑后的工藝流程 (Process B:TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑 + Expi293細胞 + BalanCD培養(yǎng)基;Process C:TransIT-VirusGEN® 轉(zhuǎn)染試劑 + VP2.0細胞 + BalanCD培養(yǎng)基)均有著更高的病毒滴度(圖2)和更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 圖1. 從125mL搖瓶線性放大至200L反應(yīng)體系的病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結(jié)果 圖2. 采用Mirus的工藝平臺均有著更高的病毒滴度 Mirus Bio 并沒有止步于此,并于2024年10月7日重磅推出 TransIT®-AAViator AAV轉(zhuǎn)染試劑。繼續(xù)沿用Mirus Bio 多聚物及脂質(zhì)兩組分的經(jīng)典組合,不同的是應(yīng)用逆向工程思維,基于現(xiàn)有RevIT? AAV Enhancer,從Mirus Bio多聚物及脂質(zhì)庫中,分別篩選出更優(yōu)化的脂質(zhì)和聚合物配方。新推出的TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染體系,進一步降低了 AAV工藝生產(chǎn)流程中所需質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑使用量,最大限度地提高不同AAV血清型滴度和實心率,從而提升 AAV生產(chǎn)工藝的總體生產(chǎn)效率。整合TransIT®-AAViator的AAV病毒上游生產(chǎn)工藝,無需通過細胞密度而調(diào)整試劑和質(zhì)粒DNA加入量,并且實現(xiàn)了單個生物反應(yīng)器的生產(chǎn)劑量的成倍增加,大幅度降低了單位劑量的成本,為基于AAV 病毒的基因治療開發(fā)提供了更優(yōu)的解決方案。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱: TransIT®-AAViator Transfection System 上市日期:2024年10月7日 產(chǎn)品貨號: MIR 73750 / MIR 73745 產(chǎn)品組分:TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV增強子 Mirus Bio AAV病毒生產(chǎn)相關(guān)轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對150 mL 規(guī)格試劑 TransIT-AAViator®提升AAV生產(chǎn)效率&降低單劑量成本 生產(chǎn)劑量的成倍增加 隨著AAV病毒滴度的提升,單個反應(yīng)器所允許生產(chǎn)劑量也成倍的增加,從而大幅度降低單劑量成本。 減少生產(chǎn)所需批次 提高AAV病毒生產(chǎn)總產(chǎn)量,減少每次生產(chǎn)的所需批次數(shù)量或擴大生物反應(yīng)器規(guī)模才可滿足生產(chǎn)需求,緩解了由于產(chǎn)能不足等諸多限制。 減少質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),降低了至少一半質(zhì)粒 DNA使用量 ,同時仍可保持高水平的滴度和實心率,進一步降低了批次生產(chǎn)成本。 加快工藝開發(fā)進程 TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),只需較少實驗優(yōu)化,即可獲得最佳結(jié)果,從而縮短了工藝開發(fā)時間,加快了產(chǎn)品上市速度。 TransIT®-AAViator有著更高滴度和實心率 使用不同的質(zhì)粒設(shè)計(GFP基因-圖3;RPE65 基因-圖4),平行比較TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)與“Poly F”(Polyplus FectoVIR® 病毒轉(zhuǎn)染試劑)以及“Poly P” (Polyplus PEIpro®病毒轉(zhuǎn)染試劑)。實驗結(jié)果顯示,在不同AAV血清型別中 (AAV5、8、9),TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)有著更高的病毒滴度及實心率,當(dāng)質(zhì)粒設(shè)設(shè)計替換成治療性基因(RPE65 基因),病毒滴度及實心率相比于競爭品牌,其優(yōu)勢更加顯著。 圖3. 轉(zhuǎn)染GFP基因質(zhì)粒的AAV滴度 圖4. 轉(zhuǎn)染RPE65基因質(zhì)粒的AAV滴度 TransIT®-AAViator降低質(zhì)粒DNA用量 TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染系統(tǒng),在較低質(zhì)粒 DNA 用量仍可得到高水平AAV病毒滴度及實心率(圖5)。 圖5. 實驗使用TransIT® -AAViator轉(zhuǎn)染試劑(試劑:DNA比例為1.25:1,vol:wt),以 1:1:1 的質(zhì)粒質(zhì)量比轉(zhuǎn)染 pAAV-WPRE-GFP (Aldevron), pAAV-Helper (Aldevron) 和 pAAV-RepCap (AAV9 Genemedi)三質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染時加入RevIT AAV Enhancer(1 μl/mL),轉(zhuǎn)染后 72 小時使用化學(xué)裂解法收獲 AAV病毒。 TransIT-AAViator實驗流程 Step 1: 轉(zhuǎn)染前,需保證生長在培養(yǎng)基中的懸浮 HEK 293 細胞活率 > 95%。 Step 2: 轉(zhuǎn)染時:建議細胞密度為 ~ 3 × 10E6 cells/mL,TransIT®- AAViator 試劑與DNA 加入比例為1:1 - 1.5:1,每 1 mL 培養(yǎng)基加入RevIT AAV Enhancer 0.5 - 1.5 μl;靜止條件下孵育15-45 分鐘,以便形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物,然后輕柔的加入細胞中。 Step 3: 轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基,一般可在轉(zhuǎn)染后 48-72 小時收獲AAV病毒。 客戶案例分享 最新線上webinar:Enhancing AAV Production: A Novel Transfection System for Cell and Gene Therapy Applications (鏈接) 演講者信息: Webinar內(nèi)容一覽: 通過該線上Webinar,可了解TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),包括了開發(fā)初衷、數(shù)據(jù)性能對比及展示等。來自Affinia Therapeutics 高級工藝開發(fā) Michael White, 強調(diào)了該轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的可擴展性和工作流程的易整合性,是想要優(yōu)化上游工藝和增加整體成本效益的理想選擇。 此外,Michael White分享了 Affinia Therapeutics AAV轉(zhuǎn)染平臺體系納入TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng)經(jīng)驗,強調(diào)該系統(tǒng)能夠降低質(zhì)粒DNA用量,同時也在不同規(guī)模中進行了測試(搖瓶-3L反應(yīng)器),可穩(wěn)定的保持高水平滴度,從而大幅度提高了生產(chǎn)工藝的效率,同時降低了AAV病毒生產(chǎn)成本。 討論重點包括: Affinia 比較了新一代轉(zhuǎn)染系統(tǒng)TransIT®-AAViator與當(dāng)前使用的平臺工藝; Affinia 在將TransIT-AAViator® 與其他試劑性能進行比較中,如何優(yōu)化使其性能顯著優(yōu)于其他轉(zhuǎn)染試劑; 整合TransIT®-AAViator轉(zhuǎn)染系統(tǒng),相比于優(yōu)化前實現(xiàn)了3 倍滴度提升及 70% 實心率。 小結(jié) 新一代專為優(yōu)化AAV 生產(chǎn)工藝而推出的轉(zhuǎn)染試劑: TransIT®-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng): 與基于單個組分(如PEI)轉(zhuǎn)染試劑不同,可顯著的提高不同AAV 血清型別的滴度及實心率; 有著更低轉(zhuǎn)染試劑及質(zhì)粒DNA使用量需求,同時保持高水平的AAV滴度及實心率; 相比于競爭品牌(FectoVIR&PEIpro等),有著更高基因組滴度及實心率,并且質(zhì)粒設(shè)計為治療基因,其優(yōu)勢更加顯著。 相關(guān)產(chǎn)品信息及鏈接 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 貨號 NEW! TransIT®-AAViator Transfection System 2 x 1.5 ml MIR 73750 1 × 30 ml MIR 73745 RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW! RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN® GMP級別轉(zhuǎn)染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN® AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN® GMP級別AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN® LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN® GMP級別LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP Mirus成立于1995年,始終秉承著為基因遞轉(zhuǎn)提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過 25 年轉(zhuǎn)染領(lǐng)域的深根細作,獲得了多項技術(shù)突破,已成為核酸遞送領(lǐng)域的全球領(lǐng)導(dǎo)者和值得信賴的品牌。Mirus科學(xué)家團隊不斷突破轉(zhuǎn)染技術(shù)的極限,推出了VirusGEN®轉(zhuǎn)染試劑與RevIT?增強劑,進一步提升AAV/LV產(chǎn)量,助力推動生物治療藥物的降本增效,為CGT領(lǐng)域客戶賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)代理,始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.yinaibengfa.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

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Bambanker細胞凍存液保護性能好、成分明確且滿足GMP生產(chǎn)標準,是生物制品細胞庫凍存的理想方案。 更多>

生物制品內(nèi)毒素去除策略——Etoxiclear?內(nèi)毒素親和層析

內(nèi)毒素作為生物藥安全檢項,是法規(guī)要求的必檢項,所有藥物生產(chǎn)對于內(nèi)毒素的控制都非常嚴格(<5EU/kg體重),內(nèi)毒素的去除成為生物藥工藝控制的一個重要環(huán)節(jié)。內(nèi)毒素去除目前面臨的困境是比較耗時,同時去除過程也會導(dǎo)致產(chǎn)品的損失以及毒性物質(zhì)的引入。所以內(nèi)毒素的去除一直困擾很多企業(yè),特別是在大腸桿菌大規(guī)模生產(chǎn)階段。 內(nèi)毒素的去除方法主要有超速離心,離子交換和親和層析的方法,在大規(guī)模生產(chǎn)工藝中內(nèi)毒素的去除主要采用后兩種方式,離子交換原理是結(jié)合帶負電荷的內(nèi)毒素,對于質(zhì)粒DNA或者酸性蛋白質(zhì)的內(nèi)毒素去除效果會不夠理想,所以目前工業(yè)界傾向于親和層析的方法去除內(nèi)毒素。親和層析的好處在于能夠特異性結(jié)合內(nèi)毒素,終產(chǎn)品的損失少(相對于離子交換),應(yīng)用范圍較廣,包括質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì),同時,也不會有毒性物質(zhì)的引入。 本文將推薦一款來自英國Astrea Bioseparations的Etoxiclear?層析介質(zhì),它是一種高性能、非離子交換、合成的親和層析吸附劑,可經(jīng)濟高效地去除內(nèi)毒素,支持GMP生產(chǎn),有凝膠和一次性預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,滿足不同的工藝需求。 什么是EtoxiClear?親和層析? 親和層析是一種特殊的蛋白質(zhì)純化方法,其利用生物分子之間的特異相互作用進行分離。EtoxiClear?親和層析針對內(nèi)毒素具有高選擇性和高分辨率,可以更好的去除內(nèi)毒素。親和層析的優(yōu)點在于其高度特異性和高純度,適用于對純度要求很高的生物制品的生產(chǎn)。雖然過離子柱可以在一定程度上控制內(nèi)毒素水平,但是個別項目仍然會有超標的可能。EtoxiClear?是市場上非常獨特的一款去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,相比于離子層析方法,EtoxiClear?優(yōu)勢包括:高特異性:專為去除內(nèi)毒素而設(shè)計,可特異性去除內(nèi)毒素高載量:高內(nèi)毒素動態(tài)結(jié)合載量(> 1,000,000 EU/ml);經(jīng)濟高效,支持放大;pH兼容范圍廣:pH 4.0 - pH 8.0,滿足GMP物料要求,法規(guī)注冊資料完善低蛋白結(jié)合率:通常目的蛋白回收率>90%;高度穩(wěn)定、人工合成、無毒的親和配基;有預(yù)裝柱和填料兩種產(chǎn)品形式,可滿足不同需求。填料耐堿性強:0.5M-1M NaOH CIP EtoxiClear?內(nèi)毒素親和填料性能數(shù)據(jù) 可擴展性EtoxiClear?已被證明能夠在實驗室規(guī)模(5mL柱)和工業(yè)規(guī)模(785mL)下有效去除純化的免疫球蛋白溶液中的內(nèi)毒素。上樣:含有相似起始內(nèi)毒素濃度的IgG蛋白溶液(~5 mg/mL) 處理能力強EtoxiClear?可提供填料和預(yù)裝柱兩種形式產(chǎn)品,以滿足不同的實驗需求。下表可用于估算處理不同規(guī)模樣品所需的柱尺寸。規(guī)格:EvolveD?柱,5 min保留時間 針對常用緩沖液的內(nèi)毒素清除數(shù)據(jù)EtoxiClear?可用于各種緩沖液的內(nèi)毒素去除。下表顯示了細胞培養(yǎng)應(yīng)用中常用的各種緩沖液的內(nèi)毒素清除效率,即使較低的起始內(nèi)毒素濃度(~20EU/mL)也可以有較高的內(nèi)毒素清除率。* 等于或低于檢測限值 高內(nèi)毒素清除率EtoxiClear?具有很高的內(nèi)毒素清除率,可從多種蛋白樣品中進行出色的蛋白質(zhì)回收,如下表所示的人血清白蛋白(HSA)和免疫球蛋白(IgG)溶液(均為~9 mg/mL)。 HSA樣品內(nèi)毒素清除率99.7% IgG樣品內(nèi)毒素清除率98.9% 低蛋白結(jié)合率與離子交換吸附劑不同,EtoxiClear?顯示出極低的蛋白質(zhì)結(jié)合性,不受蛋白質(zhì)等電點范圍限制,蛋白質(zhì)回收率高(通常高于90%),如下所示: EtoxiClear?技術(shù)參數(shù) 產(chǎn)品訂購信息貨號品名規(guī)格3250-00010EtoxiClear (10 mL)10mL3250-00025EtoxiClear (25 mL)25mL3250-00100EtoxiClear (100 mL)100mL3250-00500EtoxiClear (500 mL)500mL3250-01000EtoxiClear (1 L)1L6646EtoxiClear? 4 x 1 mL4x1mL6647EtoxiClear? 4 x 5 mL4x5mL6746EtoxiClear® Column, 1 x 1 mL1 x 1 mL6747EtoxiClear® Column, 1 x 5 mL1 x 5 mL4251-00005EtoxiClear 5 mL Column5mL4251-00050EtoxiClear 50 mL Column50mLAS025100-PC3250-GEtoxiClear 50 mL EvolveS50mL4520-PC3250EtoxiClear?, 200 µL200µL Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué),擁有超過30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,是世界級層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過21個生產(chǎn)工藝通過了FDA和EMA的批準。Astrea Bioseparations在全球擁有3個研發(fā)和生產(chǎn)基地,專注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)領(lǐng)先的層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù),解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時問題,實現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過程,完全符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。 西美杰是Astrea Bioseparations中國區(qū)代理,為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎隨時撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.yinaibengfa.cn了解更多信息。 更多>

Applichem藥典級二甲基亞砜DMSO,萬能溶劑的卓越之選

二甲基亞砜(DMSO)是一種含硫有機化合物,因為結(jié)構(gòu)中具有一個親水的亞硫?;蛢蓚€疏水的甲基,它既可與水溶液也可與除石油醚外的大多數(shù)有機溶劑互溶,可以溶解約80%的化合物,具有“萬能溶劑”的稱號。在實驗中通常應(yīng)用在以下方面: 1. 細胞凍存 DMSO是一種有效的低溫保護劑,能夠在細胞凍存過程中減少冰晶形成,降低冰晶對細胞的物理損傷。同時,DMSO能夠提高細胞膜的透過性,使細胞更易于吸收凍存保護劑,從而提高細胞在低溫下的存活率。 2. 藥物和化合物的溶解劑 DMSO具有極佳的溶解能力,能夠溶解許多其他溶劑難以溶解的有機化合物,包括多種藥物,這使得DMSO成為進行藥物篩選和細胞治療研究中的理想溶劑。 3. 作為滲透劑 DMSO的滲透特性使其能夠增加細胞膜的透性,幫助藥物、DNA等分子進入細胞。 4. 在化學(xué)和生物學(xué)反應(yīng)中的應(yīng)用 在某些化學(xué)合成和酶促反應(yīng)中,DMSO可作為反應(yīng)介質(zhì),促進反應(yīng)的進行或提高反應(yīng)的效率。DMSO還可能影響細胞的信號傳導(dǎo)途徑,對于研究細胞生物學(xué)過程有時可以是一個有用的副作用。 PanReac AppliChem的藥典級二甲基亞砜 (貨號:191954),歐洲生產(chǎn),高純度,超低金屬離子含量,符合ICH Q3D質(zhì)量標準,滿足USP, Ph Eur, BP等多國藥典。質(zhì)優(yōu)價廉,供應(yīng)穩(wěn)定,有1L、2.5L、5L、25L、190L多種規(guī)格,滿足不同應(yīng)用和工藝階段需求,一直受到全球客戶的廣泛青睞。 更多>

Pfanstiehl 喜獲第16個CDE登記號-鹽酸氨丁三醇Tris HCL

“ 熱烈祝賀Pfanstiehl的注射級鹽酸氨丁三醇Tris HCL(T-154)喜獲CDE登記號F20240000584. 這是Pfanstiehl產(chǎn)品獲得的第16個CDE登記號!”生物緩沖劑在生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用。Tris (三羥甲基氨基甲烷) 和Tris HCL是生物制藥行業(yè)應(yīng)用非常廣泛的緩沖液,在維持溶液pH穩(wěn)定方面發(fā)揮著重要作用,Tris Base的應(yīng)用非常廣泛,可用于藥物生產(chǎn)、有機合成、生物緩沖劑等,而Tris-HCL是Tris和鹽酸(HCL)的混合物,主要作用增加溶液的離子強度,從而穩(wěn)定pH值。Tris-HCL也是其他緩沖液如TBS、TBST、TE等的重要成分。目前藥典對Tris HCL無專論,Pfanstiehl將贊助USP設(shè)立Tris HCL的專論。Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均為注射級別,具有高純度,超低內(nèi)毒素,超低金屬雜質(zhì)殘留的特點,并同時檢測各種酶的殘留,如DNA酶,RNA酶,磷酸酶和脂肪酶等,也是全球首款將亞硝酸鹽加入質(zhì)控標準的Tris Base和Tris HCL,符合生物制藥和疫苗的生產(chǎn)要求。目前Pfanstiehl的Tris Base和Tris HCL均已完成DMF和CDE的備案。產(chǎn)品信息: · 產(chǎn)品名稱: Tris HCl, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals· 中文名稱:鹽酸氨丁三醇· 分子式:C4H12ClNO3· 分子量:157.59g/mol· CAS號:1185-53-1· 產(chǎn)品貨號:T-154產(chǎn)品特點:· 高純度,超低內(nèi)毒素,超低微生物含量,超低金屬雜質(zhì)殘留· 質(zhì)量指標新增DNA,RNA,DNA酶,RNA酶,脂肪酶的檢測· 符合ICH Q3D標準DNA· 符合GMP標準· CDE登記號:F20240000584· DMF登記號:039584產(chǎn)品應(yīng)用:· 緩沖液 如果您對Pfanstiehl的Tris Base T-153和Tris HCL T-154感興趣,可聯(lián)系Pfanstiehl 中國區(qū)代理北京西美杰科技有限公司獲得詳細的產(chǎn)品概況說明文件。也歡迎聯(lián)系獲取測試樣品。 Pfanstiehl Inc.最新產(chǎn)品系列如下,歡迎聯(lián)系北京西美杰獲取100g裝免費樣品。北京西美杰科技有限公司為Pfanstiehl中國代理,為客戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。歡迎撥打西美杰客服電話400-050-4006或者登陸網(wǎng)站www.yinaibengfa.cn了解更多信息。 更多>

Cygnus Protein A Mix-N-GoTM ELISA,蛋白A殘留檢測的金標準

Cygnus Protein A Mix-N-Go?系列ELISA試劑盒是專為檢測大多數(shù)天然和重組Protein A殘留而設(shè)計,其采用了革命性的一步法樣品處理程序。相比傳統(tǒng)的Protein A ELISA方法,Mix-N-GoTM系列ELISA試劑盒簡化了實驗步驟,縮短了實驗時間,同時提高了方法的可靠性。 更多>

GMP RevIT? AAV Enhancer新上市,助力于AAV病毒GMP生產(chǎn)

自2023年7月底Mirus上市RevIT? AAV Enhancer以來,RevIT? AAV Enhancer的加入允許不同血清型AAV病毒基因組滴度提高1.2-4.9倍,并且在一定程度提升了實心率,使得AAV生產(chǎn)上游成本進一步降低成為可能,降低了基因治療單劑量成本。由于可輕松靈活的將RevIT整合入現(xiàn)有AAV生產(chǎn)工藝工作流程中,不僅可以搭配Mirus TransIT-VirusGEN&reg; GMP 轉(zhuǎn)染試劑,也適配于其他轉(zhuǎn)染試(如PEI),RevIT? AAV Enhancer得到了國內(nèi)外AAV客戶的廣泛認可及好評,GMP級別試劑也按照計劃如期上市,用于大規(guī)模的AAV GMP生產(chǎn)。 RevIT? AAV Enhancer于2024年9月30日推出GMP級別,由ISO 13485體系認證的工廠生產(chǎn),符合ISO 20399以及USP<1043>標準。自2023年7月28上市的RevIT? AAV Enhancer,已證明在不同血清型、細胞培養(yǎng)基以及轉(zhuǎn)染平臺上,可提高至少2-4倍病毒滴度;在保持高質(zhì)量滴度的同時,允許更低質(zhì)粒DNA用量,從而大幅度降低AAV病毒生產(chǎn)成本。 產(chǎn)品詳情 產(chǎn)品名稱:RevIT? GMP AAV Enhancer 上市日期:2024年9月30日 產(chǎn)品貨號:MIR 8200-GMP 產(chǎn)品規(guī)格:200mL(液體) 更多RevIT? AAV Enhancer數(shù)據(jù)及RevIT? AAV Enhancer詳細信息,請見微信軟文《新品上市 | RevIT? AAV Enhancer, 提高AAV產(chǎn)量的又一利器!》 RevIT AAV Enhancer 以及TransIT-VirusGEN 轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品參數(shù) * HDPE材質(zhì)管/瓶 *只針對30 mL以及150 mL 規(guī)格試劑 **只針對150 mL 規(guī)格試劑 GMP支持詳情 Residual Reagent Assay殘留檢測 Regulatory Support Package 法規(guī)支持文件 Product Safety Risk Assessment | Supplemental Information產(chǎn)品安全性風(fēng)險評估| 補充信息 Manufactured and Tested in Alignment with Mirus 生產(chǎn)及檢測與Mirus標準體系一致 ISO 13485 QM Mirus Bio GMP 質(zhì)量標準 ISO 13485驗證體系 Mirus Bio所開發(fā)以及供應(yīng)的輔助材料(Ancillary material),可用于細胞和基因療法的RUO和GMP合規(guī)性工藝生產(chǎn)。 Mirus Bio的質(zhì)量管理體系通過了ISO 13485認證,可用于技術(shù)轉(zhuǎn)讓以及分銷GMP級輔助材料。 Mirus Bio 開發(fā)及實施以客戶為中心的質(zhì)量管理體系(QMS),可作為值得信賴的合作伙伴,滿足細胞和基因治療客戶需求的承諾。以下指導(dǎo)文件為Mirus Bio建立質(zhì)量管理體系所參考的質(zhì)量標準文件: ISO 13485:2016, Medical devices – Quality management systems – Requirements for regulatory purposes ISO 20399:2022, as ancillary materials present during the production of cellular therapeutic products USP<1043>, with respect to Tier 2 ancillary materials for cell, gene and tissue-engineered product 更多客戶案例分享 最新線上webinar:Pairing a novel enhancer with transfection reagents to enable high-titer rAAV production 演講者信息: Florian Dziopa,MeiraGTx 上游工藝負責(zé)人(Director of Upstream Process) ,在MeiraGTx工作的過去六年里,一直致力基于懸浮HEK293細胞瞬轉(zhuǎn)工藝的AAV生產(chǎn)平臺優(yōu)化。 René Gantier,Repligen 高級生物工藝應(yīng)用研發(fā)Director,有著超過二十年的產(chǎn)品開發(fā)及工藝純化經(jīng)驗。 Becky Reese,Mirus Bio研發(fā) 該Webinar可以 (線上觀看鏈接): 了解如何實現(xiàn)病毒載體的生產(chǎn)工藝流程優(yōu)化提升; 了解 VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑是如何幫助涉及不同種轉(zhuǎn)染工作流程以及 AAV 血清型的工藝流程,其產(chǎn)量全面提升; 從生產(chǎn)工藝流程角度出發(fā),如何降低細胞和基因療法的單位劑量成本 簡化了從技術(shù)評估到工藝生產(chǎn)的整個過程 Poster數(shù)據(jù):Optimizing Key Parameters for AAV5 Clinical Manufacturing: Enhancing Process Productivity and Drug Substance Quality (鏈接) Bridgebio在該poster中分享了基于AAV5型別,使用TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑以及RevIT? AAV Enhancer在搖瓶階段線性放大至200L(125mL搖瓶→2L → 10L → 200L)病毒滴度和實心率數(shù)據(jù)結(jié)果(圖左)。與之前工藝相比 (工藝A:PEIPro轉(zhuǎn)染 + Expi293細胞/培養(yǎng)基),替換成TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑的工藝流程 (工藝B:TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑 + Expi293細胞 + BalanCD培養(yǎng)基;工藝C:TransIT-VirusGEN&reg; 轉(zhuǎn)染試劑 + VP2.0細胞 + BalanCD培養(yǎng)基),有著更高的病毒滴度(圖右)及更低的宿主DNA和質(zhì)粒DNA殘留。 相關(guān)產(chǎn)品信息 產(chǎn)品名稱 規(guī)格 貨號 RevIT? AAV Enhancer 1.5 ml MIR 8000 10 x 1.5 ml MIR 8006 75 ml MIR 8080 NEW! RevIT? GMP AAV Enhancer 200 ml MIR 8200-GMP VirusGEN&reg; AAV轉(zhuǎn)染試劑及RevIT? AAV Enhancer For 1L of Culture MIR 8007 For 10L of Culture MIR 8008 TransIT-VirusGEN&reg;轉(zhuǎn)染試劑 0.3 ml MIR 6703 0.75 ml MIR 6704 1.5 ml MIR 6700 5 x 1.5 ml MIR 6705 10 x 1.5 ml MIR 6706 30 ml MIR 6720 TransIT-VirusGEN&reg; GMP級別轉(zhuǎn)染試劑 150 ml MIR 6845-GMP VirusGEN&reg; AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6750 VirusGEN&reg; GMP級別AAV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6815-GMP VirusGEN&reg; LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 kit for 1 L of cell culture MIR 6760 VirusGEN&reg; GMP級別LV轉(zhuǎn)染試劑(套裝) 1 Kit - for 50 L of cell culture MIR 6825-GMP 新產(chǎn)品速遞 TransIT&reg;-AAViator 轉(zhuǎn)染系統(tǒng),基于Mirus Bio專利且成熟的聚合物和脂質(zhì)技術(shù)平臺上做開發(fā),與單純基于聚合物(PEI)的轉(zhuǎn)染試劑相比,可進一步提高 AAV 載體的產(chǎn)量,并允許降低一半的質(zhì)粒 DNA 用量。TransIT-AAViator 系統(tǒng)由新型 TransIT-AAViator 轉(zhuǎn)染試劑和 RevIT? AAV 增強劑組成。結(jié)合使用后,極大的優(yōu)化了AAV工藝生產(chǎn)中關(guān)鍵一環(huán)-上游轉(zhuǎn)染,最大限度提高 AAV 滴度,更多詳情敬請期待。 Mirus成立于1995年,始終秉承著為基因遞轉(zhuǎn)提供優(yōu)化方法及高效的工具。憑借超過 25 年轉(zhuǎn)染領(lǐng)域的深根細作,獲得了多項技術(shù)突破,已成為核酸遞送領(lǐng)域的全球領(lǐng)導(dǎo)者和值得信賴的品牌。Mirus科學(xué)家團隊不斷突破轉(zhuǎn)染技術(shù)的極限,推出了VirusGEN&reg;轉(zhuǎn)染試劑與RevIT?增強劑,進一步提升AAV/Lv產(chǎn)量,助力推動生物治療藥物的降本增效,為CGT領(lǐng)域客戶賦能。 北京西美杰科技有限公司是Mirus中國區(qū)總代理,始終秉承著專業(yè)、嚴謹?shù)膽B(tài)度為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù),Mirus熱銷轉(zhuǎn)染產(chǎn)品常備現(xiàn)貨。如果您對上述產(chǎn)品感興趣,歡迎致電北京西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網(wǎng)站www.yinaibengfa.cn了解更多產(chǎn)品信息。 更多>

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北京西美杰科技有限公司(Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd,以下簡稱西美杰)于2006年成立,由留美歸國生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅持自己的經(jīng)營理念,勤奮踏實地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源,為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案,幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時間... 更多>

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